低氧条件下小鼠精母细胞中热休克蛋白A2及几种热休克转录因子的表达变化

作者：李锐; 殷骏; 张庆华^*

来源：中国男科学杂志, 2023, 37(05): 39-44.

• 低氧
• 热休克蛋白质类
• 热休克转录因子
• 精子发生

目的 探索低氧条件下精子发育功能障碍的可能机制。方法 使用6孔细胞培养板常规传代培养小鼠精母细胞GC-2至对数生长期，选择8块细胞培养板，随机等分为低氧组和对照组。将低氧组与对照组分别培养于Inviv O2工作站(参数设置：1%O2;5%CO2;94%N2;37℃)和温、湿度恒定的二氧化碳(5%)培养箱中，低氧处理6、12、24及48 h后，各随机取出1块细胞培养板作为对应时间梯度的低氧组及其对照组，将低氧组6孔细胞再随机等分为两个小组，其中3孔用于提取总RNA,另3孔用于提取总蛋白，对照组作相同处理。分别通过实时荧光定量PCR技术和western blot技术检测GC-2中HSPA2、HSF1及HSF2基因表达。结果 HSPA2基因mRNA水平仅在低氧处理24 h后一过性升高(P<0.05),但低氧处理6、12及48 h后，均未见明显变化(P>0.05)。HSPA2蛋白在低氧处理6 h后未见明显变化(P>0.05),但低氧处理12、24及48 h后显著降低(P<0.05)。HSF1基因mRNA水平在低氧处理6及12 h后显著降低(P<0.05),低氧处理24 h后无明显变化(P>0.05),但在低氧处理48 h后显著上升(P<0.05)。HSF1蛋白在低氧处理6、12、24及48 h后均显著降低(P<0.05)。HSF2基因mRNA在低氧处理6、12、24及48 h后均未发生显著变化(P>0.05),而其对应的HSF2蛋白在低氧处理6、12及24 h后也未见明显差异(P>0.05),但在低氧处理48 h后显著降低(P<0.05)。结论 低氧条件下，HSPA2、HSF1、HSF2基因表达均发生显著变化，HSPA2、HSF1、HSF2可能都是低氧致精子发育功能障碍的关键介导因子。

• 单位
  中国人民解放军陆军军医大学; 大坪医院