基于Sirt1/FoxO1通路探讨瑞马唑仑减轻脓毒症小鼠脑损伤的机制研究

作者：郭小丽; 杨昌明; 王婵; 王先圆; 刘荣莉^*

来源：中国实验动物学报, 2023, 31(01): 82-90.

• 瑞马唑仑
• 脓毒症相关性脑病
• 神经炎症
• 氧化应激
• 沉默信息调节因子1
• 叉头框蛋白O1

目的 探究瑞马唑仑对脓毒症引起的脑损伤的影响及机制。方法 雄性C57BL/6J小鼠，采用随机数字表法分为假手术组、模型组、瑞马唑仑组(8 mg/kg)、瑞马唑仑+Sirt1抑制剂(EX527)组(8 mg/kg瑞马唑仑+5 mg/kg EX527)、EX527组，每组38只。采用盲肠结扎穿孔法(CLP)制备脓毒症相关性脑病(SAE)小鼠模型。给予相应的干预后，观察并记录术后7 d内小鼠存活率，采用Morris水迷宫检测小鼠逃避潜伏期和穿越平台次数；手术后24 h,通过伊文斯蓝(EB)渗漏量评估血脑屏障(BBB)通透性，酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测脑组织白细胞介素(IL)-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α、IL-1β水平，化学比色法检测脑组织丙二醛(MDA)水平和超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性，HE染色观察海马组织病理学变化，TUNEL法检测神经元凋亡，蛋白免疫印迹(Western Blot)检测海马组织沉默信息调节因子1(Sirt1)/叉头框蛋白O1(FoxO1)通路相关蛋白表达。结果 与假手术组相比，模型组小鼠的存活率、穿越平台次数、SOD和CAT活性、Sirt1和胞质NF-κB p65蛋白水平显著下降，逃避潜伏期、脑组织EB含量、IL-6、TNF-α、IL-1β和MDA水平、海马神经元凋亡指数、乙酰化FoxO1(Ac-FoxO1)/FoxO1比值和乙酰化核因子-κB p65(Ac-NF-κB p65)、胞核NF-κB p65蛋白水平显著升高(均P<0.05);与模型组相比，瑞马唑仑组小鼠的存活率、穿越平台次数、SOD和CAT活性、Sirt1和胞质NF-κB p65蛋白水平显著升高，逃避潜伏期、脑组织EB含量、IL-6、TNF-α、IL-1β和MDA水平、海马神经元凋亡指数、Ac-FoxO1/FoxO1比值和Ac-NF-κB p65、胞核NF-κB p65蛋白水平显著降低(均P<0.05);EX527可抑制Sirt1表达，显著减弱瑞马唑仑对SAE小鼠的上述保护作用(均P<0.05)。结论 瑞马唑仑可提高脓毒症小鼠存活率，通过维持BBB完整性、抑制神经炎症和氧化应激，减少神经元凋亡，减轻脓毒症引起的脑损伤；其作用机制可能与激活Sirt1/FoxO1通路，抑制NF-κB活化有关。

• 单位
  荆门市第一人民医院