科研之友
微信
新浪微博
Facebook
分享链接
摘要
目的:获得P11-A1融合蛋白并对融合蛋白的生物活性进行分析。方法:将人类载脂蛋白A1和P11基因进行拼接,然后连接在表达载体pBV220上,将表达载体转化到大肠杆菌BL21进行表达,SDS-PAGE分析其表达情况。通过离子交换层析对融合蛋白进行纯化、Western印迹检测纯化产物。用液体闪烁计数器检测融合蛋白体外合成高密度脂蛋白(HDL)的能力来测定转酯活性,同时用溶圈法检测融合蛋白的溶栓活性。结果:融合蛋白的表达量为29%;离子交换层析获得纯度约为90%的蛋白;Western印迹显示该重组蛋白能够特异地识别载脂蛋白A1抗体,并且该融合蛋白在浓度为0.28 mg/ml时转酯活性为21.93 nmoL/(h·ml),溶栓活性为22.2 U/mg。结论:成功获得具有转酯活性和溶栓功能的P11-A1融合蛋白。
-
单位军事医学科学院基础医学研究所
