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摘要
目的：建立快速、高效制备小鼠睾丸基因敲降的平台。方法：设计和构建靶向睾丸特异性表达基因Sox30转录本的shRNA表达载体（pSliencer-GFP-shSox30）及其对照质粒（pSliencer-GFP-shScramble），与慢病毒颗粒包装后通过网微注射转导至出生24 d小鼠睾丸生精小管管腔，利用免疫荧光等检测慢病毒敲降鼠体内靶向基因的效率及敲降Sox30后对生殖细胞发育的影响。结果：慢病毒处理敲降后，相比对照组小鼠，shSox30病毒敲降组小鼠睾丸组织中Sox30蛋白表达水平显著下调，生精管腔中圆形精子发育阻滞在2～3步，Ⅶ～Ⅷ期生精管腔中无长型精子。结论：shRNA慢病毒有效降低小鼠睾丸靶基因的表达水平，在制备睾丸特定基因敲降动物模型中具有巨大优势。
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单位生殖医学国家重点实验室; 南京医科大学
