紫红笛鲷MHC Ⅱα和MHC Ⅱβ多克隆抗体的制备

作者：王天燕; 常虹; 余时琛; 陈璐; 蔡中华

来源：现代生物医学进展, 2013, (01): 1-4.

DOI：10.13241/j.cnki.pmb.2013.01.001

• MHC
• 主要组织相溶性复合体
• 抗体
• 鱼
• 紫红笛鲷 MHC
• Major histocompatibility complex
• Antibody
• Fish
• Lutjanus argentimaculatus

目的:制备紫红笛鲷主要组织相溶性复合体MHC Ⅱα和MHC Ⅱβ多克隆抗体,为蛋白水平研究紫红笛鲷MHC II分子提供理论和实践依据。方法:从已有的紫红笛鲷cDNA文库菌中分别克隆其MHC Ⅱα和MHC Ⅱβ分子的部分开放阅读框,与PQE-30构建表达载体,转入大肠杆菌E.coli M15以IPTG诱导表达;纯化得到的重组蛋白与弗氏佐剂混合乳化后注射新西兰大白兔制备多克隆抗体,再以酶联免疫吸附(ELISA)和免疫印迹(Western blot)检测所获抗血清的效价及效果。结果:①重组表达和纯化得到紫红笛鲷MHC Ⅱα和MHC Ⅱβ部分肽链。②制备的紫红笛鲷MHC Ⅱα和MHC Ⅱβ兔抗血清效价...

• 单位
  清华大学深圳研究生院; 清华大学