分子信标荧光定量PCR技术检测结核分枝杆菌方法建立及其临床应用

作者：方梅; 陆巧荣; **强

来源：四川大学学报（医学版）, 2010, 41(01): 162-165.

DOI：10.13464/j.scuxbyxb.2010.01.009

• 结核分枝杆菌
• 分子信标
• 荧光定量PCR Mycobacterium tuberculosis Molecular beacon Real-time PCR

目的建立结核分枝杆菌的分子信标荧光定量PCR检测方法,探讨该方法检测结核分枝杆菌的临床应用价值。方法针对结核分枝杆菌Ag85BDNA特异保守序列设计引物和分子信标探针,并构建标准品。采用分子信标荧光定量PCR法、抗酸染色法、集菌培养法检测158例肺结核患者痰液标本,比较3种方法的检出率。结果所建立方法最低检测限度为2个基因拷贝/反应,在2×102～2×108基因拷贝/mL范围内,Ct值同DNA量的对数呈线性关系。该方法检测5株非分枝杆菌和6株非结核分枝杆菌结果均为阴性,检测结核分枝杆菌H37Rv出现75 bp特异条带。分子信标荧光定量PCR法、抗酸染色法、集菌培养法阳性检出率分别为60.13%...