长寿相关基因p66shc在过氧化氢所致内皮细胞功能损伤中的作用和机制

作者：唐湘铧; 范燕; 李纯; 张湘瑜^*

来源：中华老年医学杂志, 2017, 36(08): 920-924.

• 内皮细胞
• 过氧化氢

目的探讨p66shc在过氧化氢(H2O2)所致内皮细胞功能损害中的作用和可能的机制。方法培养人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC), 分别用H2O2、H2O2和蛋白激酶C(PKC)抑制剂、H2O2和PKC激活剂、H2O2和P38抑制剂处理30 min或不处理, 24 h后收集细胞。噻唑篮法检测HUVEC存活率, Ki-67染色检测HUVEC增殖活性, 免疫荧光染色法检测HUVEC的凋亡, 蛋白质免疫印迹法检测p66shc蛋白、ser36磷酸化p66shc蛋白的表达, 实时定量反转录聚合酶链式反应检测p66shc mRNA的表达。结果 H2O2可诱导HUVEC功能损伤, 使HUVEC的增殖活性降低、细胞凋亡增加、使p66shc蛋白和ser36磷酸化p66shc蛋白、p66shc mRNA的表达上调(t=2.57、2.94、3.04、3.15、2.64, P=0.024、0.015、0.003、0.001、0.021)。PKC抑制剂可抑制H2O2诱导的HUVEC功能损伤, 使受损的HUVEC的增殖活性增加、细胞凋亡减少、下调p66shc蛋白和ser36磷酸化p66shc蛋白、p66shc mRNA的表达(t=2.12、2.31、2.16、2.32、2.98, P=0.035、0.020、0.030、0.025、0.005)。PKC激活剂可增加H2O2诱导的HUVEC功能损伤, 使HUVEC的增殖活性进一步降低、细胞凋亡增加、使p66shc蛋白和ser36磷酸化p66shc蛋白、p66shc mRNA的表达进一步上调(t=1.29、3.59、1.65、1.87、3.15, P=0.043、0.000、0.040、0.035、0.001)。p38抑制剂对H2O2诱导的HUVEC功能损伤和p66shc的表达无明显影响。结论 p66shc在H2O2所致内皮细胞功能损害中起重要的调节作用, p66shc可能通过PKC信号通路来调节H2O2所致的内皮功能损伤。

• 单位
  中南大学湘雅二医院