miR-28调控非小细胞肺癌细胞增殖、迁移与侵袭的作用机制

作者：麦宗炯; 蔡玉莹; 王美才; 杨志雄; 吴爱兵^*

来源：海南医学, 2022, 33(16): 2041-2047.

• 非小细胞肺癌
• miR-28
• Ras相关蛋白1b
• 增殖
• 迁移
• 侵袭

目的 探讨微小RNA-28 (miR-28)对非小细胞肺癌细胞株细胞A549和H1299的影响及其作用机制。方法 通过转染miR-28 mimics过表达miR-28，转染miR-28 inhibitor抑制miR-28的表达，其中miR-28 NC作为对照组。通过CCK-8实验、克隆形成试验和细胞周期实验分别评估过表达miR-28、抑制miR-28对非小细胞肺癌细胞增殖能力的影响；通过划痕实验、Transwell迁移及Boyden小室侵袭实验分别评估过表达miR-28、抑制miR-28对非小细胞肺癌细胞迁移与侵袭能力的影响；通过生物信息学软件分析发现Ras相关蛋白1b (RAP1B)可能是miR-28的潜在靶基因并利用荧光素酶报告基因实验进行验证；通过RT-qPCR和Western blot方法检测过表达和抑制miR-28表达后A549和H1299细胞RAP1B的表达。结果 与miR-28 NC比较，miR-28 mimics组A549和H1299细胞的增殖速度明显减慢，迁移及侵袭能力明显减弱，差异均有统计学意义(P<0.05);miR-28 inhibitor组A549和H1299细胞的增殖速度增快，迁移及侵袭能力明显增强，差异均有统计学意义(P<0.05)；在非小细胞肺癌细胞中，荧光素酶报告基因实验表明miR-28可以靶向RAP1B基因；与miR-28 NC比较，miR-28 mimics组A549和H1299细胞RAP1B m RNA和RAP1B蛋白的表达明显减少，差异均有统计学意义(P<0.05);miR-28 inhibitor组A549和H1299细胞RAP1B mRNA和RAP1B蛋白的表达明显增加，差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 miR-28可能通过下调靶基因RAP1B从而抑制非小细胞肺癌细胞的增殖、迁移与侵袭。

• 单位
  湛江中心人民医院; 广东医科大学附属医院