林麝源化脓隐秘杆菌、溶血性曼氏杆菌和肺炎链球菌三重实时荧光定量PCR检测方法的建立

作者：唐婕; 刘二龙; 周建文; 杨超; 索丽娟; 边坤; 蒋本模; 王艳^*

来源：动物医学进展, 2020, 41(12): 23-27.

DOI：10.16437/j.cnki.1007-5038.2020.12.005

• 林麝
• 化脓隐秘杆菌
• 溶血性曼氏杆菌
• 肺炎链球菌
• 三重实时荧光定量PCR

为快速准确检测化脓隐秘杆菌、溶血性曼氏杆菌和肺炎链球菌,分别根据化脓隐秘杆菌plo基因、溶血性曼氏杆菌ICEMh1基因和肺炎链球菌pspC基因的特异性序列设计引物和探针,以重组质粒a.p-m.h1-s.p为标准品,通过优化反应条件,建立一种检测化脓隐秘杆菌、溶血性曼氏杆菌和肺炎链球菌三重实时荧光定量PCR方法,对其特异性、灵敏度和可重复性进行测试。结果表明,建立的方法对标准品阳性质粒的最低检测量为20拷贝,标准曲线在1.25×106 copies/μL～1.0×101 copies/μL范围内具有良好的线性关系。对2016年-2018年在陕西省收集的病料中化脓隐秘杆菌、溶血性曼氏杆菌和肺炎链球菌检出率分别为66.67%、5.5%和44.44%。建立的三重实时荧光定量PCR方法能快速、准确和稳定地检测化脓隐秘杆菌、溶血性曼氏杆菌和肺炎链球菌。

• 单位
  陕西省动物研究所; 凤县逢春济民可信科技养殖有限公司