SAT2型口蹄疫病毒南非地区分离株结构蛋白VP1及其C端的表达、纯化和反应原性分析

作者：高闪电; 常惠芸; 独军政; 邵军军; 丛国正; 林彤; 韩雪清; 谢庆阁

来源：细胞与分子免疫学杂志, 2010, (07): 631-634.

DOI：10.13423/j.cnki.cjcmi.005728

• SAT2型口蹄疫病毒
• 结构蛋白VP1
• 原核表达
• 反应原性分析 FMDV serotype SAT2
• structural protein VP1
• prokaryotic expression
• reactivity analysis

目的:表达SAT2型口蹄疫病毒结构蛋白VP1及其C端,进行反应原性分析并制备多克隆抗体。方法:以SAT2型口蹄疫病毒南非地区分离株结构蛋白VP1编码区的重组克隆载体为模板,设计特异性引物,扩增VP1基因及其C端编码区,然后将该其分别克隆至原核表达载体pET-30a(+)中,转化大肠杆菌工程菌株BL21(DE3)plysS,经IPTG诱导,以金属离子螯合层析法对表达的VP1、VP1C端融合蛋白进行纯化,经Westernblot对其反应原性进行分析。用纯化的蛋白免疫新西兰大耳白兔制备其多克隆抗体,以ELISA方法测定抗体效价。结果:实现了SAT2型口蹄疫病毒结构蛋白VP1及其C端的高效表达,表达产...

• 单位
  家畜疫病病原生物学国家重点实验室; 农业部; 中国检验检疫科学研究院; 中国农业科学院兰州兽医研究所