Krüppel样因子4基因高表达增强食管鳞癌细胞株对顺铂敏感性

作者：马钊; 于振涛; 刘肖琼; 张洪典; 陈传贵^*

来源：中华实验外科杂志, 2018, 35(03): 484-487.

• 癌,鳞状细胞
• 顺铂
• 甲基化
• 药物敏感性

目的观察食管鳞癌细胞株中Krüppel样因子4(KLF4)启动子区甲基化水平对其表达及对顺铂耐药性的影响。方法采用甲基化特异性聚合酶链反应(PCR)及反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测7种食管鳞癌细胞株中KLF4甲基化及表达水平,筛选KLF4高甲基化及低甲基化水平细胞株(TE1及KYSE140)。不同顺铂浓度下,使用噻唑蓝(MIT)法检测不同细胞株的增殖活性,使用流式细胞仪检测不同细胞株细胞凋亡及细胞周期。结果细胞株CAES17、EC109、KYSE140、KYSE70和KYSE30中KLF4相对高表达,其启动子区呈低甲基化,细胞株TE1和KYSE510中KLF4相对低表达,其启动子区高甲基化。使用5-Aza-CdR去除其甲基化可恢复TE1细胞株KLF4表达。MTT法示,在顺铂终质量浓度为0.5、1.0、5.0、10.0 mg/L时,使用5-Aza-CdR处理TE1后细胞抑制率均增加G=5.053,P=0.007;t=3.792,P=0.019;t=5.119,P=0.007;t=7.213,P=0.002),KYSE140细胞抑制率高于TE1(t=6.156,P=0.004;t=5.463,=0.005;t=10.211,P=0.001;t=13.278,P=0.000)。流式细胞仪检测示,顺铂终质量浓度为1.0 mg/L时,使用5-Aza-CdR处理TE1前后差异无统计学意义[(6.2±0.9)%比(7.0±0.7)%,P=0.290],TE1细胞株凋亡率低于KYSE140细胞株凋亡率[(6.2±0.9)%比(9.1±1.5)%,P=0.045]。顺铂终质量浓度5.0 mg/L及10.0 mg/L时,使用5-Aza-CdR处理TE1后细胞凋亡率均增加(t=7.838,P=0.001;t=5.196,P=0.007)。同时,顺铂终质量浓度5.0 mg/L及10.0 mg/L时,KYSE140细胞株的死亡率高于TE1细胞株(t=4.260,P=0.013;t=10.535,P=0.000)。顺铂终质量浓度0.1 mg/L和0.5 mg/L时,经5-Aza-CdR处理后TE1细胞株和KYSE140细胞株均与TE1细胞株在S期细胞比例上差异有统计学意义。结论食管鳞癌细胞株中KLF4启动子区甲基化抑制表达,顺铂作用下,KLF4高表达可增加食管鳞癌细胞株对顺铂敏感性,使细胞周期阻滞在S期。

• 单位
  天津医科大学