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摘要
以萝卜为材料,对基因组DNA的RAMP分析体系中的Mg2+、dNTPs和引物浓度进行优化。分别设计3个浓度梯度:Mg2+为0.75、1.5、3.0 mmol.L-1;dNTPs为0.05、0.15、0.3mmol.L-1;引物为0.065、0.2、0.4μmol.L-1,并对合适退火温度进行研究。筛选出的RAMP优化体系为(20μL):dNTPs 0.15 mmol.L-1,Mg2+1.5 mmol.L-1,引物0.2~0.4μmol.L-1,DNA10 ng,Taq E 0.8U;PCR扩增程序为94℃3 m in,94℃1 m in,45℃1 m in,72℃1.5 m in,42个循环,...
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单位南京农业大学; 作物遗传与种质创新国家重点实验室
