实时荧光定量测定人B细胞激活因子受体-BCMA基因表达水平

作者：沈荣春; 鞠少卿; 王跃国; 丛辉; 徐云

来源：陕西医学杂志, 2006, 35(11): 1503-1505.

DOI：10.3969/j.issn.1000-7377.2006.11.044

• @B细胞成熟抗原
• 单核细胞/免疫学
• 聚合酶链反应
• 荧光免疫测定
• 基用表达

目的:研究建立实时荧光定量聚合酶链反应(RFQ-PCR)检测人B细胞激活因子受体-BCMA含量的方法,及探讨其外周血单个核细胞(PBM C)中BCMA mRNA表达的检测价值。方法:在BCMA基因高保守区设计特异性引物和荧光探针,用逆转录-PCR扩增目的片段实时检测产物的荧光强度,根据标准品建立标准曲线,由软件自动计算出待测样本中BCMA mRNA含量,并以BCMA mRNA和2βM mRNA含量的比值进行BCMA表达水平评价。结果:RFQ-PCR检测BCMA含量的线性范围为109pg/m l~101pg/m l,低浓度样本批内和批间变异系数(CV)分别为13.5%和11.2%,高浓度样本批内和批间CV分别为8.9%和9.7%。30例健康献血员样本的PBM C中,90%(27例)检出有BCMA mRNA表达,范围为0.10~0.98。结论:RFQ-PCR检测BCMA mRNA含量的方法,具有较好的检测灵敏度和重复性。

• 单位
  南通大学附属医院