摘要
目的观察锶离子(Sr2+)对钛颗粒(Ti)诱导破骨细胞(OC)活化的影响。方法实验分为5组,即空白组、Ti组、核因子受体活化因子配体(RANKL)组、R+Ti组、Sr2+组。采用细胞增殖-毒性检测试剂盒(CCK-8)检测0.1 g/L Ti和不同浓度Sr2+(0.5、1.0、2.0、5.0、10.0 mol/L)处理小鼠单核/巨噬细胞株RAW264.7细胞24、48、72 h后增殖活性;以0 1 g/L Ti和/或70μg/L RANKL和/或不同浓度Sr2+诱导RAW264.7细胞,培养5 d后,用抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色检测成熟OC数量;以逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测组织蛋白酶K(Cath-K)、TRAP、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和降钙素受体(CTR)mRNA含量;Westem blot法检测κB抑制蛋白α(IκBα)表达水平。结果 CCK-8结果,0.1 g/L Ti和不同浓度Sr2+(0.5、1.0、2.0、5 0、10.0 mmol/L)对RAW264.7细胞增殖能力无影响。TRAP染色,R、R+Ti组均可见大量的紫红色多核细胞;Ti组和Sr2+组多核细胞较少;Sr2+≥5 mmol/L时,TRAP阳性细胞数量[(323.33±43.84)、(146.67±33 99)个/孔],与R组[(453.33±33.99)个/孔]比较,差异有统计学意义(P<0 05)。RT-PCR结果显示,Sr2+组Cath-K、TRAP、MMP-9和CTR mRNA的相对表达量分别为2.76±0.66、2.69±0.57、2.10±0.34和1.72±0.32,与R+Ti组比较(7.97±0.77、10.10±1.18、7.37±1.02和5.55±0.53),差异有统计学意义(P<0.05)。Western blot结果显示Ti能抑制IκBα的表达,Sr2+加入后Ti的抑制效应不明显。结论 Sr2+能有效地抑制Ti诱导的OC活化。
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单位苏州大学附属第一医院