黄芪丹参提取物改善急性呼吸窘迫综合征大鼠肺损伤的作用和机制研究

作者：沈桢巍; 石怡; 吴珊珊; 李佳敏; 陈伟^*

来源：中国中医基础医学杂志, 2023, 29(02): 240-246.

DOI：10.19945/j.cnki.issn.1006-3250.2023.02.015

• 黄芪丹参提取物
• 急性呼吸窘迫综合征
• 中性粒细胞
• IL-4Rα

目的 通过大鼠在体研究明确黄芪丹参提取物对急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distress syndrme,ARDS)大鼠肺损伤的影响及作用机制。方法 通过慢病毒途径在大鼠肺部靶向沉默白细胞介素(interleukin,IL)4Rα,经黄芪丹参提取物给药后通过油酸与脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)联合诱导建立大鼠ARDS模型,造模后6 h应用称重法检测肺组织湿干重比,HE染色评估肺组织病理学改变,酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中肿瘤坏死因子(tumor necrosing factor,TNF)-α、IL-1β、IL-6含量以及肺组织中髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)活性。流式细胞术检测BALF来源中性粒细胞凋亡率。免疫印迹法检测BALF来源中性粒细胞中IL-4Rα及半胱氨酸蛋白酶3水解体(Caspase 3-cleaved)蛋白表达,荧光定量PCR检测肺组织中趋化因子含量。结果 与假手术组比较,ARDS模型组大鼠肺组织湿干重比明显增加(P<0.01),肺组织损伤评分明显升高(P<0.01),BALF中炎症因子TNF-α、IL-1β和IL-6含量和肺组织中MPO含量明显升高(P<0.01)。BALF来源中性粒细胞凋亡率稍降低(P>0.05)。IL-4Rα与Caspase 3-cleaved蛋白表达明显减弱(P<0.01)。肺组织中趋化因子CCL2、CCL3和CCL17 m RNA表达量明显增加(P<0.01)。10 mg/(kg·d)和30 mg/(kg·d)黄芪丹参提取物连续3 d灌胃给药能够明显改善上述指标的异常变化(P<0.05,P<0.01)。IL-4Rα沉默能有效逆转黄芪丹参提取物的上述作用(P<0.05,P<0.01)。结论 黄芪丹参提取物能够通过上调IL-4Rα表达并间接诱导ARDS大鼠肺部中性粒细胞凋亡诱导因子Caspase 3-cleaved表达而导致中性粒细胞程序性坏死,并最终有效降低肺部炎症因子释放和减轻ARDS导致的大鼠肺损伤。

• 单位
  上海中医药大学; 上海中医药大学附属龙华医院