Hlcs干扰对C2C12细胞成肌成脂分化后糖酵解基因表达的影响

作者：代宇星; 史银银; 温作晨; 罗云燕; 祝雪丽; 郑春婷; 李淑英; 洪亮; 张建斌; 郭亮; 蒲蕾^*

来源：畜牧兽医学报, 2022, 53(10): 3391-3402.

• Hlcs基因
• siRNA干扰
• C2C12细胞
• 成肌成脂诱导
• 糖酵解基因

旨在研究全羧化酶合成酶(holocarboxylase synthetase, Hlcs)对糖酵解基因表达的影响，为进一步研究细胞糖酵解奠定基础。本试验以C2C12细胞为试验材料，采用siRNA技术干扰Hlcs基因，通过荧光定量PCR和Western blotting检测Hlcs基因干扰对糖酵解基因表达的影响。结果表明，在C2C12细胞分化过程中，Hlcs基因与Pfkm、Pkm、Hk-2基因的表达趋势一致，提示Hlcs基因与糖酵解具有相关性。干扰Hlcs后，细胞分化形成的肌管数量明显少于对照组，糖酵解限速酶Pfkm的mRNA水平显著降低(P<0.05),而显著提高了Pkm的mRNA水平和蛋白表达水平(P<0.05);生物素作为羧化酶的辅酶，能够显著上调Pkm、Hk-2的mRNA水平(P<0.05)。干扰Hlcs后，细胞分化形成的脂滴数量明显少于对照组，Pfkm的mRNA水平显著升高(P<0.05),且Pkm的mRNA水平和蛋白表达水平显著升高(P<0.05);生物素的添加能够显著上调Pfkm、Pkm的mRNA水平(P<0.05)。综上所述，在C2C12细胞分化过程中，Hlcs基因与糖酵解基因表达趋势一致，且干扰Hlcs基因可以抑制成肌分化C2C12细胞中Pfkm和Hk-2基因的表达，促进Pkm的表达；而促进成脂分化C2C12细胞中Pfkm和Pkm的表达，抑制Hk-2基因的表达。

• 单位
  天津农学院