摘要
目的:探讨复合成骨诱导剂对骨髓基质干细胞(Bone Marrow Stromal Stem Cells,BMSCs)成骨分化的影响。方法:选取2月龄SD雄性大鼠2只,处死后冲洗股骨,胫骨骨髓腔获得骨髓组织,采用贴壁培养法纯化大鼠BMSCs,并进行原代和传代培养。取第三代BMSCs,将细胞分AG 7个组,A组为对照组:在不含任何诱导剂的培养基内培养;B组为常规诱导组:在仅含有诱导剂(10.0mmol/β-甘油酸钠,10-8mol/L地塞米松,50mg/L抗坏血酸)的培养基内培养;C,D,E,F,G组为复合诱导组,在含有复合诱导剂(常规诱导剂+阿仑膦酸钠)的培养基内培养,其中阿仑膦酸钠的浓度分别是10-6mol/L、10-7mol/L、10-8mol/L、10-9mol/L、10-10mol/L。观察细胞贴壁生长增殖及形态变化,western-blot法检测骨形态发生蛋白(BMP-2)的表达。结果:观察发现各组细胞贴壁生长良好,呈长梭形,细胞均存活,E组细胞体积变得肥大,长出多个胞浆突起呈多角形,细胞周围可见云雾状分泌物。A组中细胞呈长梭形增殖,形态未见明显变化,分泌物最少。各周各组western检测发现BMP-2表达量顺序均如下:10-8mol/L组>10-7mol/L组>10-9mol/L组>10-6mol/L组>10-10mol/L组>常规诱导组>空白对照组。结论:阿仑膦酸钠在低浓度(10-8mol/L)时对骨髓基质干细胞成骨分化具有促进作用。
- 单位