尼可地尔对抗高糖引起的H9c2心肌细胞损伤和炎症反应

作者：陈美姬; 梁伟杰; 李健豪; 郑东诞; 兰军; 陈景福; 廖新学

来源：中国药理学通报, 2016, 32(12): 1657-1665.

DOI：10.3969/j.issn.1001-1978.2016.12.006

• 尼可地尔
• 核因子-κB
• 环氧化酶-2
• 高糖
• 心肌细胞
• 损伤
• 炎症

目的探讨尼可地尔(nicorandil,Nic)能否通过调控核因子-κB(nuclear factorκB,NF-κB)/环氧化酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)通路对抗高糖引起的H9c2心肌细胞损伤和炎症。方法应用细胞计数盒(CCK-8)检测心肌细胞存活率;蛋白质免疫印迹法测定NF-κB、COX-2和cleaved caspase-3蛋白的表达水平;乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)试剂盒检测细胞培养液中LDH的活性;双氯荧光素染色荧光显微镜照相法测定胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平;Hoechst 33258核染色荧光显微镜照相法测定凋亡细胞数量;罗丹明123染色荧光显微镜照相法检测线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,MMP);ELISA法检测细胞培养液中白介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的水平。结果 35 mmol·L-1葡萄糖(高糖,HG)作用H9c2心肌细胞24 h能明显降低心肌细胞存活率。在HG作用前,应用20100μmol·L-1Nic预处理60 min或50μmol·L-1Nic预处理30120 min均可明显对抗HG对心肌细胞存活率的抑制作用。另一方面,HG可上调心肌细胞磷酸化(p)-NF-κB p65和COX-2的表达,50μmol·L-1Nic预处理心肌细胞60 min能抑制HG诱导的p-NF-κB p65和COX-2表达的上调。此外,HG作用心肌细胞24 h可引起明显的心肌细胞损伤和炎症反应,使培养液中LDH活性、ROS生成、凋亡细胞数量、cleaved caspase-3表达、MMP丢失及炎症因子IL-1β和TNF-α的分泌均增加;在HG作用前,应用50μmol·L-1Nic预处理心肌细胞60 min或应用100μmol·L-1PDTC(NF-κB抑制剂)或10μmol·L-1NS-398(COX-2抑制剂)和HG共处理心肌细胞24 h能明显拮抗HG引起的上述损伤和炎症反应。结论 Nic通过抑制NF-κB/COX-2通路对抗HG引起的H9c2心肌细胞损伤和炎症。

• 单位
  广州市番禺区中心医院; 东莞市第三人民医院; 中山大学附属第一医院