牛轮状病毒抗原捕获ELISA方法的建立与应用

作者：常继涛; 张佳昕; 于力^*

来源：中国预防兽医学报, 2018, 40(12): 1142-1146.

• 牛轮状病毒
• 抗原捕获ELISA
• 检测
• 单克隆抗体

为建立牛轮状病毒(BRV)抗原检测方法,本研究以BRV VP6蛋白的多克隆抗体为捕获抗体、VP7蛋白的G6/G10共享型单克隆抗体(MAb)为检测抗体,建立了BRV抗原捕获ELISA方法。特异性试验结果显示,该ELISA方法与牛肠道病毒、牛呼肠孤病毒、牛细小病毒、牛传染性鼻气管炎病毒、牛副流感病毒3型、牛病毒性腹泻病毒以及阿卡斑病毒无交叉反应。敏感性试验结果显示,本研究建立的ELISA方法最低可以检出104.2 TCID50病毒,而商品化ELISA试剂盒和RT-PCR方法的最低检出限分别为104.86 TCID50和103.36 TCID50病毒。该方法组内和组间的变异系数均小于10%,表明重复性良好。应用该ELISA方法对67份牛腹泻粪便样品进行检测,结果显示BRV阳性率为18%,与商品化试剂盒和RT-PCR方法的符合率均为100%。本研究建立的抗原捕获ELISA方法可以用于BRV的规模化检测,为BRV的病原流行病学调查研究提供了有效的技术手段。

• 单位
  中国农业科学院哈尔滨兽医研究所; 兽医生物技术国家重点实验室