大鼠睡眠剥夺后下丘脑组蛋白乙酰化修饰对小胶质细胞的作用

作者：霍芳芳; 史明; 屈杜洁; 郭生龙; 郭向阳; 刘士福; 郝敏锋; 吴中亮

来源：山西医科大学学报, 2018, 49(05): 464-469.

DOI：10.13753/j.issn.1007-6611.2018.05.003

• 睡眠剥夺
• 组蛋白乙酰化
• 小胶质细胞
• 下丘脑
• 大鼠

目的观察睡眠剥夺(sleep deprivation,SD)对大鼠下丘脑区小胶质细胞的影响和组蛋白乙酰化水平的改变,及提高组蛋白乙酰化水平对小胶质细胞活化以及相关炎症因子表达的影响。方法采用改良式多平台水环境法制备SD模型。利用组蛋白去乙酰化酶抑制剂异羟戊酸(SAHA)抑制组蛋白去乙酰化酶,提高组蛋白去乙酰化修饰水平。将45只雄性大鼠(8-9周龄)随机分为:对照组(control组)、睡眠剥夺3 d组(SD3组)、睡眠剥夺3 d+SAHA(SD3+SAHA)、睡眠剥夺6 d组(SD6组)、睡眠剥夺6 d+SAHA(SD6+SAHA),每组9只大鼠。SD3组与SD6组分别连续剥夺大鼠睡眠3 d与6 d,SD3+SAHA组和SD6+SAHA组分别于睡眠剥夺前一天开始连续腹腔注射SAHA,直至睡眠剥夺结束。采用免疫荧光染色Iba-1标记各组大鼠下丘脑区小胶质细胞活性状态。采用Western blot检测各组大鼠下丘脑区组蛋白乙酰化水平[用组蛋白H3亚基第9位赖氨酸乙酰化(H3K9AC)水平表示],RT-PCR检测各组大鼠下丘脑区TNF-α、IL-6、NOS2、IL-10炎症因子的表达。结果与control组相比,SD3组和SD6组下丘脑区小胶质细胞活化增多(P<0.05),H3K9AC水平明显降低(P<0.01),TNF-α、IL-6、NOS2、IL-10炎症因子的表达增加(P<0.05)。SD3+SAHA组与SD3组相比下丘脑区小胶质细胞活化数目减少(P<0.05),H3K9AC水平明显提高(P<0.05),IL-6、NOS2表达明显减少(P<0.01)。SD6+SAHA组与SD6相比,下丘脑区小胶质细胞活化数目减少(P<0.05),H3K9AC水平明显提高(P<0.05),TNF-α表达减少(P<0.05),IL-6、NOS2表达明显减少(P<0.01),而IL-10表达增多(P<0.05)。结论睡眠剥夺可增强大鼠下丘脑区小胶质细胞的活性,亦可降低下丘脑组织中组蛋白乙酰化水平;提高组蛋白乙酰化水平表达可降低睡眠剥夺后小胶质细胞的活性,并可抑制下丘脑中促炎因子表达。

• 单位
  神经内科; 第四军医大学; 西京医院; 西安市中心医院