多重-PCR检测CTX-M超广谱β-内酰胺酶基因

作者：刘文恩; Peter M Hawkey; Craig J Munday

来源：实用预防医学, 2006, 13(04): 838-840.

DOI：10.3969/j.issn.1006-3110.2006.04.011

• 多重
• 多聚酶链反应(PCR)
• CTX-M
• 超广谱β-内酰胺酶
• 基因

目的建立一种多重PCR方法在肠杆菌中检测所有组的CTX-M基因。方法设计两组引物可分别在两个区域检测所有CTX-M组的大多数blaCTX-M基因。一条四组CTX-M基因的共同保守区引物与另外四条逆向引物或五条逆向引物一起同时使用可分别检测出每一组特异性CTX-M基因。PCR反应混合物体积25 ul含每条引物25 pM。对6株标准菌株(产CTX-M-26的肺炎克雷伯菌1株,分别产CTX-M-3,CTX-M-9及CTX-M-15的大肠杆菌各1株,产CTX-M-14的大肠杆菌2株)和90株临床分离株进行CTX-M检测。结果已知携带CTX-M的菌株作为标准均获得预期PCR产物,对90株临床分离株应用多重-PCR扩增,有68株获得阳性结果。进一步测序及分析显示,这些基因均为编码CTX-M-15超广谱β-内酰胺酶的基因。结论我们已成功设计一种多重PCR在单一反应管可同时检测多种CTX-M基因无须多次PCR反应。此方法可以快速准确检测出ESBLs表型阳性菌中CTX-M基因。

• 单位
  中南大学湘雅医院