阿特拉津高灵敏酶联免疫吸附检测法的建立

作者：李晓丽; 王婷婷; 刘凯; 宁保安; 马新华; 刘楠; 欧国荣; 高志贤; 刘忠文

来源：中国应用生理学杂志, 2018, 34(02): 187-192.

• 阿特拉津
• 检测
• 酶联免疫吸附法

目的:建立高灵敏度的阿特拉津酶联免疫吸附检测法。方法:将间接竞争ELISA进行条件优化以提高检测灵敏度,包括包被抗原与一抗的最佳工作浓度筛选、选择一抗的最佳稀释度对包被抗原进行细化筛选、不同有机溶剂对竞争结合反应的影响、酶标二抗稀释度筛选等。用建立的酶联免疫检测法检测实际样品,再与高效液相色谱法(HPLC)检测进行比较。结果:利用优化后条件建立了阿特拉津间接竞争ELISA检测曲线,标准曲线的相关系数R2=0.9958,相关性较好。另由此标准曲线可得LOD(最低检出限)为1.972 ng/ml。用于检测实际样品,回收率在80%-120%之间。当添加样品浓度为(06)ng/ml时,该法的检测灵敏度高于HPLC。结论:新建立的阿特拉津ELISA特异性好、精密度高,可代替大型仪器用于阿特拉津实际样品检测。