薄层分析等电聚焦方法测定重组MUC1等电点及其性质的应用

作者：孙琳; 张培因; 戴莉; 王燕媚; 于永利; 王丽颖

来源：中国现代医学杂志, 2006, (20): 3101-3103.

• 薄层等电聚焦电泳
• 重组MUC1
• 等电点

目的采用薄层等电聚焦方法检测含有组氨酸尾的粘蛋白表位疫苗(简称重组MUC1),为不含有组氨酸尾的粘蛋白表位疫苗的下一步离子交换层析纯化蛋白提供参考依据。方法用两性电解质(Ampho-line)制备薄层凝胶,平铺在LKB电泳仪上,先预电泳15min,然后加样,电泳至电流不在下降停止电泳。测量等电点标准蛋白距阳极的泳动距离,然后绘制标准曲线,计算出含有组氨酸尾的重组MUC1的等电点值。根据测定的等电点值,选用阴离子交换层析法方法纯化不含有组氨酸尾的重组MUC1。结果等电聚焦方法测定含有组氨酸尾的重组MUC1等电点为5.4,阴离子交换层析法方法纯化获得纯度为83.5%的不含有组氨酸尾的重组MUC1。结论等电聚焦方法间接测定含有组氨酸尾的重组MUC1等电点,为不含有组氨酸尾的重组MUC1进一步的离子交换层析纯化蛋白提供了参考数据。

• 单位
  基础医学院; 吉林大学