摘要
目的 将储存大于35 d的少白悬浮红细胞中纯化的红细胞微粒(RMP),与诱导极化THP-1巨噬细胞共培养,探究其对巨噬细胞极化的免疫调控作用。方法 通过离心结合超滤管方法分离RMP,经流式细胞术、透射电镜及粒径仪检测验证纯化得到的RMP;用PKH26标记RMP后,采用激光共聚焦观察RMP进入巨噬细胞的情况;采用脂多糖(LPS)或白细胞介素4(IL-4)诱导THP-1巨噬细胞极化并给予RMP处理,通过实时荧光定量PCR检测THP-1细胞M1型巨噬细胞标志分子诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、 IL-6;M2型巨噬细胞标志分子IL-10、 CD163、 CD206的mRNA表达水平。结果 获得纯化的RMP, RMP可被巨噬细胞摄入,LPS诱导THP-1巨噬细胞M1极化,IL-4则诱导THP-1巨噬细胞M2极化,RMP处理后iNOS、 TNF-α、 IL-6、 CD206、 CD163、 IL-10表达均显著降低。结论 RMP抑制THP-1巨噬细胞的M1及M2型极化。
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单位西安交通大学第一附属医院; 中国人民解放军空军军医大学