ChREBP在糖尿病大鼠视网膜中的表达及作用机制研究

作者：许康康; 肖青; 李亚男; 李鹏程^*

来源：联勤军事医学, 2023, 37(04): 271-313.

DOI：10.13730/j.issn.2097-2148.2023.04.001

• 碳水化合物反应元件结合蛋白
• 糖尿病性视网膜病变
• 硫氧还蛋白相互作用蛋白

目的 观察转录因子碳水化合物反应元件结合蛋白(carbohydrate response element binding protein, ChREBP)在糖尿病(diabetes mellitus, DM)大鼠视网膜组织中的表达变化，探索其在糖尿病性视网膜病变(diabetic retinopathy, DR)中的作用分子机制。方法 采用随机数字表法将40只雄性SD大鼠分为DM组和对照组，每组20只。DM组给予一次性腹腔注射1%链脲佐菌素(streptozocin, STZ)(60 mg/kg)建立DM模型；对照组注射等量的柠檬酸盐缓冲液。造模后每月监测大鼠血糖变化，3月后麻醉处死。获取大鼠眼球行冰冻切片，分别利用苏木精-伊红(hematoxylin-eosin, HE)染色和免疫荧光染色观察两组大鼠视网膜结构的病理变化并检测ChREBP在视网膜中的分布变化。利用实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative real-time-polymerase chain reaction, qPCR)及Western blot检测大鼠视网膜组织中ChREBP和其下游靶基因硫氧还蛋白相互作用蛋白(thioredoxin-interacting protein, TXNIP)的表达变化。结果 与对照组相比，DM组血糖浓度显著升高(P<0.05),同时生长缓慢，体质量偏低(P<0.05)。HE染色显示在3月时DM组已经出现DR早期的病理变化。免疫荧光染色显示ChREBP在DM组大鼠的视网膜组织中表达量较对照组增加，部分蛋白分布由胞质转移至胞核。qPCR检测显示DM组大鼠视网膜组织中ChREBP和TXNIP的mRNA表达水平较对照组显著升高(P均<0.05)。Western blot检测显示ChREBP蛋白表达水平较对照组表达显著增加(P<0.05)。结论 在DM大鼠视网膜组织中，ChREBP的表达增加并出现核转移。ChREBP可能通过调节下游分子TXNIP的表达参与DR的发生发展。

• 单位
  华中科技大学同济医学院附属协和医院