摘要
目的构建5-FAM标记的葡聚糖(dextran)Fe3O4超顺磁性纳米颗粒,检测其物理和磁学性质、细胞毒性,并观察其在磁场下标记细胞的能力。方法在超声波乳化作用下,用化学共沉淀法制备5-FAM-dextran-Fe3O4纳米颗粒;用透射电镜和粒度分析仪观察微粒形态和大小;红外分析仪检测微粒表面结合的功能团;分光仪观察微粒的光学显像能力;振动样品磁强计检测微粒的磁响应性;MTT法检测5-FAM-dextran-Fe3O4、dextran-Fe3O4和Fe3O4微粒对神经元细胞的生物毒性;共聚焦显微镜观察将荧光纳米颗粒与细胞共同孵育并给予不同外加磁场后,纳米颗粒标记神经元细胞的面积。采用单因素方差分析处理数据。结果制得的5-FAM-dextran-Fe3O4纳米颗粒均匀一致,直径为15~25 nm,平均粒径22 nm;其比饱和磁化强度、比剩余磁化强度、矫顽力(矫顽磁场强度)分别为86.02 A·m2·kg-1、15.05 A·m2·kg-1、5 414.01 A/m,表现为超顺磁性;红外分析仪示Fe3O4被dextran包裹并与5-FAM形成复合粒子;分光仪示纳米颗粒在紫外光下呈均一绿色荧光;MTT结果提示5-FAM-dextran-Fe3O4无明显细胞毒性;共聚焦显微镜下,500 mT磁场组细胞标记面积最大[(0.880±0.046)mm2;F=320.298,P<0.05]。结论制备的5-FAM-dextran-Fe3O4纳米颗粒可作为新型荧光-磁载体或探针应用于多种实验和临床研究。
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单位浙江省人民医院; 浙江工业大学