5-氮杂胞苷上调miR-27b-5p表达对模拟失重下血管内皮细胞凋亡的影响

作者：潘益凯; 李程飞; 李曦; 范洁怡; 赵星成; 王永春; 孙喜庆^*

来源：心脏杂志, 2020, 32(03): 289-293.

• 模拟失重
• 血管内皮细胞
• 5-氮杂胞苷
• miR-27b-5p
• 凋亡

目的探究5-氮杂胞苷(5-azacytidine, 5-AZA)对模拟失重效应下血管内皮细胞miR-27b-5p表达及细胞凋亡的影响。方法体外培养人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells, HUVECs),利用MTT试剂盒检测不同浓度5-AZA(0.1μmol/L、1μmol/L、5μmol/L、10μmol/L、50μmol/L和100μmol/L)对HUVECs的毒性作用。采用qRT-PCR技术观察模拟失重环境下miR-27b-5p表达的时程变化及5-AZA药物处理对miR-27b-5p表达的影响;Western blot检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax和Cleaved Caspase-3的表达,观察5-AZA在回转模拟失重效应下对HUVECs凋亡的影响。结果 5-AZA对HUVECs的细胞毒性呈浓度依赖性。与对照组相比,0.1μmol/L、1μmol/L、5μmol/L和10μmol/L组的细胞存活率无统计学差异,50μmol/L 5-AZA组和100μmol/L5-AZA组的细胞存活率显著降低(P<0.05)。因此,我们采用10μmol/L作为后续实验5-AZA的加药浓度。在回转模拟失重效应下,HUVECs的miR-27b-5p表达显著下降(P<0.05),且随回转时间的延长而下降程度增大(P<0.05)。qRT-PCR检测结果提示,5-AZA可显著上调模拟失重效应下HUVECs中miR-27b-5p表达(P<0.05)。Western blot检测结果提示,5-AZA可显著下调模拟失重效应下HUVECs中Bax和Cleaved Caspase-3蛋白表达(P<0.05),上调Bcl-2蛋白表达(P<0.05)。结论 5-AZA通过上调miR-27b-5p表达,抑制模拟失重效应下HUVECs凋亡的发生。

• 单位
  中国人民解放军空军军医大学