肉豆蔻木酚素调控L-谷氨酸诱导的神经元细胞凋亡的机制

作者：楚新歌; 孙周; 邱新茹; 李莎; 崔春爱^*

来源：中国临床药理学杂志, 2023, 39(13): 1870-1874.

DOI：10.13699/j.cnki.1001-6821.2023.13.010

• 肉豆蔻木酚素
• FoxO3a/p27通路
• 神经元
• 细胞凋亡

目的 探讨L-谷氨酸对海马神经元毒性损伤及肉豆蔻木酚素的干预作用。方法 选用鼠性海马神经元HT22细胞，用2.5 mmol·L-1L-谷氨酸制备氧化应激细胞模型，以不同浓度肉豆蔻木酚素进行干预。将细胞分为5组：正常组、模型组(2.5 mmol·L-1谷氨基酸处理)和低(2.5μmol·L-1肉豆蔻木酚素处理)、中(5μmol·L-1肉豆蔻木酚素处理)、高(10μmol·L-1肉豆蔻木酚素处理)3个浓度实验组。用噻唑蓝(MTT)法检测神经元生存率；用WST-8法检测丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)活性；用原位末端标记(TUNEL)法染色技术观察细胞凋亡情况；用免疫荧光染色技术检测叉头框蛋白O3a(FoxO3a)、核因子κB(NF-κB)和细胞周期蛋白p27kip1(p27Kip1)、细胞周期素D1(CyclinD1)的定位及表达；用蛋白质印迹法检测各组磷酸化叉头框蛋白O3a(p-FoxO3a)、磷酸化NF-κB (p-NF-κB)、p27Kip1、CyclinD1表达。结果 24 h后，正常组、模型组和低、中、高3个浓度实验组的生存率分别为100%、(48.96±5.00)%、(65.59±3.72)%、(72.14±2.04)%、(87.76±0.69)%,模型组与正常组比较，差异有统计学意义(P<0.01);低、中、高浓度实验组与模型组比较，差异有统计学意义(均P<0.05)。模型组和低、中、高3个浓度实验组SOD活性分别为(0.46±0.04)、(0.77±0.03)、(0.87±0.03)和(1.10±0.11)U·mg-1,MDA含量分别为(55.11±1.23)、(44.77±1.07)、(41.44±1.69)和(30.38±1.96)nmol·mg-1,低、中、高3个浓度实验组与模型组比较，差异均有统计学意义(均P<0.05)。苏木精-伊红(HE)和TUNEL染色显示，低、中、高3个浓度实验组谷氨基酸所诱导的氧化损伤和海马神经元凋亡；肉豆蔻木酚素通过抑制FoxO3a阳性颗粒的细胞浆内转位和NF-κB的核转位，抑制了p27Kip1和CyclinD1表达。结论 肉豆蔻木酚素通过FoxO3a/p27Kip1通路调控谷氨酸所诱导的海马神经元凋亡，具有明显的神经保护作用。

• 单位
  解剖学教研室; 延边大学