组蛋白甲基转移酶2(SMYD2)抑制剂LLY-507对成骨分化的影响

作者：李建良; 张濛; 麦嘉乐; 何琪; 张罡瑜; 陈伟坚; 肖嘉聪; 潘兆丰; 宫大伟; 王海彬

来源：中国骨质疏松杂志, 2022, 28(03): 373-379+433.

DOI：10.3969/j.issn.1006-7108.2022.03.013

• SMYD2
• LLY-507
• MC3T3-E1
• hMSCs
• 成骨分化

目的 研究SMYD2抑制剂LLY-507对小鼠颅顶前骨细胞亚克隆14(MC3T3-E1)及人骨髓间充质干细胞(h MSCs)成骨分化的影响。方法 通过CCK-8法检测LLY-507对MC3T3-E1和h MSCs增殖的影响;采用碱性磷酸酶(ALP)染色和活性测定检测不同浓度LLY-507干预下MC3T3-E1和h MSCs早期成骨分化标志物ALP的活性情况;通过茜素红染色及半定量分析检测LLY-507对MC3T3-E1和h MSCs矿化能力的影响;运用荧光定量PCR检测h MSCs的成骨相关基因Osterix、Runx2、OPG、OPN m RNA的表达; Western blot检测h MSCs的Runx2和SMYD2蛋白表达量。结果 CCK-8结果表明LLY-507在0.8μmol/L的剂量下细胞活性无明显影响，不会明显抑制细胞增殖。ALP染色及活性测定表明，加入50 nmol/L及以上剂量的LLY-507干预7 d后能够明显抑制MC3T3-E1及h MSCs成骨分化以及碱性磷酸酶的表达(P<0.05);茜素红染色及半定量分析表明100nmol/L剂量的LLY-507能够明显抑制MC3T3-E1及h MSCs的矿化能力(P<0.05)。通过q PCR，加入25 nmol/L及以上剂量的LLY-507分别干预7 d和14 d后能够明显抑制h MSCs成骨分化相关基因Runx2、Osterix、OPG、OPN的m RNA表达(P<0.05)。通过Western blot，加入50 nmol/L及以上剂量的LLY-507干预7 d和14 d后均能够明显抑制h MSCs的Runx2蛋白和SMYD2蛋白的表达。结论 抑制SMYD2的表达能够抑制成骨相关基因的表达，说明SMYD2在成骨分化过程中起到促进成骨的作用。

• 单位
  广州中医药大学第一附属医院; 山东省文登整骨医院; 河南大学; 广州中医药大学; 河南省人民医院; 郑州大学