特异性针对大鼠甲状旁腺激素受体1基因siRNA表达载体构建及鉴定

作者：梁华晟; 薛耀明; 钟宇华

来源：中华实用诊断与治疗杂志, 2010, (05): 444-447.

• 甲状旁腺激素受体1基因
• 小分子干扰RNA
• 小发卡结构RNA
• 转染
• RNA干扰 Parathyroid hormone 1 receptor gene
• small interfering RNA
• small hairpin RNA
• transfer
• RNA interference

目的:构建并筛选携带针对大鼠甲状旁腺激素受体1基因的pSUPERretro-GFP/Neo干扰逆转录病毒载体及鉴定。方法:根据Genbank筛选甲状旁腺激素受体1基因3个阳性克隆及1个阴性克隆序列,定向克隆入逆转录病毒载体pSUPERretro-GFP/Neo,并用RT-PCR和测序鉴定,将其转染至胰岛素-1细胞中,Westernblot观察甲状旁腺激素受体1基因表达,鉴定其转染效率。结果:菌落RT-PCR及基因测序鉴定结果表明序列正确,并能成功转染到胰岛素-1细胞株中,Western blot筛选最佳抑制基因。结论:成功构建并筛选出特异性沉默大鼠甲状旁腺激素受体1基因的pSUPERretro...

• 单位
  南方医科大学; 北海市人民医院