慢病毒介导环氧化酶-2的沉默对食管鳞癌细胞增殖的抑制效应

作者:朱圣韬; 李鹏; 王青釭; 郭水龙; 邢洁; 程芮; 郭庆东; 孙秀梅; 谷俊朝; 张澍田
来源:中华临床医师杂志(电子版), 2014, 8(22): 3957-3961.

摘要

目的制备环氧化酶-2(COX-2)的RNA干扰(RNAi)重组慢病毒(lentivirus),观察COX-2表达沉默对人食管鳞癌(ESCC)细胞增殖的影响。方法将目的基因短发卡RNA(sh RNA)载体与包装载体共转染293T细胞,收集上清液后浓缩纯化、滴度测定、感染ESCC细胞;应用荧光显微镜观察包装效率及感染效率,实时荧光定量PCR及Western blot评价COX-2基因沉默效应,MTS法检测细胞的增殖。结果成功制备了沉默COX-2的重组慢病毒,该病毒感染ESCC细胞后,COX-2 m RNA和蛋白的表达量分别降低了80%和50%左右,细胞的增殖明显减慢。结论慢病毒介导的sh RNA干扰能有效沉默ESCC细胞COX-2基因,COX-2表达沉默抑制ESCC细胞增殖。

  • 单位
    首都医科大学附属北京友谊医院; 北京热带医学研究所