水牛匈爱病毒结构蛋白VP1的截短表达及多克隆抗体的制备

作者：邹延林; 张广欣; 罗宇航; 朱鑫玥; 刘黄豪; 莫筱可; 谢江; 王小玲; 陈樱; 欧阳康; 韦祖樟; 覃一峰; 潘艳^*; 黄伟坚^*

来源：中国兽医科学, 2023, 53(06): 700-705.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2023.0124

• 牛匈爱病毒
• 结构蛋白
• 原核表达
• 多克隆抗体

为了制备水牛匈爱病毒（BufHuV）结构蛋白VP1截短基因的多克隆抗体，将病毒的VP1截短基因克隆至原核表达载体pET-32a（+）获得重组质粒pET-32a-BufHuV-VP1，重组质粒转化至BL21感受态细胞（DE3）后诱导表达，VP1截短蛋白的分子质量约为31.5 ku，主要以包涵体的形式表达。以纯化好的重组蛋白免疫昆明小鼠以制备多克隆抗体，通过Western-blot与IFA鉴定其特异性。结果显示，制备的小鼠多克隆抗体能与纯化的VP1重组截短蛋白和感染BufHuV的细胞表达的VP1特异性结合，表明多克隆抗体具有良好的反应原性和特异性。水牛匈爱病毒VP1截短重组蛋白及其多克隆抗体的成功制备为研究BufHuV致病机制、VP1蛋白功能以及血清学检测方法的建立提供了材料基础。

• 单位
  广西农业职业技术学院; 广西大学