摘要
目的建立用同位素稀释液相色谱串联质谱(ID-LC/MS/MS)测定人血浆中血管紧张素Ⅱ的候选参考方法, 并对方法性能进行评价。方法以[13C6-15N]-血管紧张素Ⅱ为内标, 重量法准确称取血浆及一定量内标混合, 同时加入酶抑制剂, 经硫酸锌溶液蛋白沉淀、反相固相萃取板处理, 用液相色谱串联质谱分析, 质谱选择多反应离子监测模式检测血管紧张素Ⅱ及内标的特定离子碎片。按照ISO15193要求对所建方法进行线性、灵敏度、精密度、回收率等性能评估及不确定度的评价。结果血管紧张素Ⅱ在10~1 000 pg/g范围内线性良好(r=0.999 5), 检测下限7.68 pg/g, 加标回收率范围为97.14%~102.85%, 批内不精密度≤3.21%, 批间不精密度≤2.96%, 总不精密度≤3.67%。结论用同位素稀释液相色谱串联质谱建立了血浆血管紧张素Ⅱ的检测方法, 该方法准确可靠, 有望成为血浆中血管紧张素Ⅱ测定的参考方法。
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单位郑州大学第一附属医院; 郑州安图生物工程股份有限公司