农杆菌介导的Cas9基因转化金针菇的研究

作者：刘建雨; 刘建辉; 张丹; 徐珍; 王瑞娟; 杨慧; 于海龙; 尚晓冬

来源：食用菌学报, 2017, 24(03): 25-29.

DOI：10.16488/j.cnki.1005-9873.2017.03.005

• 金针菇
• 农杆菌介导法
• CRISPR/Cas9系统
• Cas9

将酿脓链球菌(Streptococcus pyogenes)Cas9序列(SpCas9序列,Addgene#43802)根据金针菇(Flammulina velutipes)的密码子偏好性进行优化,并构建FvCas9双元表达载体,利用农杆菌介导法转化金针菇单核体Dan3,经抗性培养基筛选以及潮霉素和Cas9基因PCR扩增验证,结果显示Cas9基因已经成功转入金针菇菌丝体中,转化率为6.84%。

• 单位
  上海市农业科学院食用菌研究所; 农业部