特异性检测鼠李糖乳杆菌的引物探针及应用

作者：李典; 杜丽霞; 陈文骋; 侯亚茹; 师文君; 李岚芳^*; 侯少阳^*

来源：生物技术, 2023, 33(04): 414-421.

DOI：10.16519/j.cnki.1004-311x.2023.04.0062

• ERIC-PCR
• 鼠李糖乳杆菌
• 引物探针
• 特异性
• 琼脂糖凝胶电泳
• 4因素3水平正交实验

[目的]基于ERIC-PCR技术设计引物探针，用于鼠李糖乳杆菌的特异性检测，探究引物探针的属性特征。[方法]以鼠李糖乳杆菌HP-B1083为研究对象，利用新型ERIC兼并引物与4因素3水平正交实验获得鼠李糖乳杆菌ERIC指纹图谱，根据鼠李糖乳杆菌ERIC序列设计特异性引物探针，并进行引物探针特异性、普适性及检测限度验证。[结果]使用ERIC-PCR技术获得的鼠李糖乳杆菌ERIC指纹图谱，成功设计了4对针对鼠李糖乳杆菌的引物探针。探针能在8种混合益生菌中特异性检出鼠李糖乳杆菌，能高效检出6株鼠李糖乳杆菌的同源菌株，在DNA为27 ng/mL的混合基因组中亦可实现鼠李糖乳杆菌的痕量检出。[结论]设计的4对引物探针能实现鼠李糖乳杆菌的特异性检出，具有高特异性、宽广谱性、强灵敏性的特征，实现DNA为27 ng/mL的混合基因组中鼠李糖乳杆菌的痕量检出，具有良好的探针属性特性。

• 单位
  菏泽学院