牛α-IFN及FMDV P12A3C双表达载体的构建及其在BHK-21细胞中的表达

作者：杨彬; 兰喜; 李宝玉; 殷相平; 李学瑞; 柳纪省

来源：生物技术通报, 2012, (02): 80-84.

DOI：10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2012.02.001

• 口蹄疫病毒
• P12A基因
• 3C基因
• α-干扰素
• pBudCE4.1载体 FMDV P12A3C gene α-IFN pBudCE4.1 vector

从口蹄疫病毒Asia I/Jiangsu毒株的细胞毒中提取总RNA,通过RT-PCR方法分别获得FMDV的P12A及3C基因;同时以pMD18-T-α-IFN质粒为模板,PCR扩增得到α-IFN基因。将α-IFN基因及FMDV P12A及3C基因连接至双启动子表达载体pBudCE4.1上,构建成双效表达质粒pBudCE4.1-α-IFN-P12A3C,经电泳、PCR、双酶切和DNA测序鉴定表明双效质粒载体构建成功。用此重组质粒转染BHK-21细胞后并对其表达情况进行检测,表明该双表达质粒在BHK-21细胞中能够成功表达。以此重组质粒免疫乳鼠后12 h,按100 TCID50/0.1 mL的量进...

• 单位
  中国农业科学院兰州兽医研究所; 家畜疫病病原生物学国家重点实验室; 农业部