地中海贫血患者来源外周血及脐带血细胞诱导式多能干细胞的建系和造血分化

作者：曾敏慧; 蒋满波; 文艳飞; 彭澄; 张滨; 蔡柳洪

来源：广东医学, 2015, 36(11): 1633-1637.

DOI：10.13820/j.cnki.gdyx.20150611.002

• 地中海贫血
• 诱导式多能干细胞
• 造血分化

目的探讨地中海贫血(地贫)患者特异诱导式多能干细胞系(i PSCs)细胞模型的建立及造血分化能力。方法采集Hb H病引产胎儿(α地贫)的脐带血、双重杂合子β地贫输血患者(基因型为IVS-Ⅱ-654/CD17)外周血各1例,分离单核细胞后进行短期培养,核转染再程序化为i PSCs,检测i PSCs未分化状态和多能性标志物。i PSCs与OP9细胞共培养向造血干细胞诱导分化,进行吉姆萨染色检查和流式细胞术检测造血干细胞的分化结果。结果地贫患者i PSCs表达干细胞多能性标志物Oct4、SSEA4、Tra-1-60、Tra-1-81,碱式磷酸酶染色阳性,悬浮培养可以形成类球形拟胚体,畸胎瘤形成实验显示地贫患者i PSCs可分化为内、中、外胚层细胞。流式细胞术检测结果显示CD34+细胞分别为8.71%(α-i PSCs分化结果)和4.46%(β-i PSCs分化结果)。结论α、β地贫患者外周血与脐带血可再程序化为i PSCs,该细胞系具有多能分化特性,与OP9共培养能分化为造血干细胞。

• 单位
  中山大学附属第三医院