双酶显色-紫外-可见分光光度法测定牛奶中组胺与腐胺的含量

作者：姚晓曈; 徐斐; 叶泰; 袁敏^*; 刘振民; 喻东威

来源：理化检验. B, 化学分册, 2022, 58(01): 40-44.

• 二胺氧化酶
• 辣根过氧化物酶
• 紫外-可见分光光度法
• 组胺
• 腐胺
• 牛奶

建立了基于二胺氧化酶-辣根过氧化物酶双酶显色的紫外-可见分光光度法测定牛奶中组胺与腐胺含量的方法。取10 mL牛奶样品，加入10 mL 2%(质量分数)硝酸铅标准溶液，混匀，再加入20 mL 0.1%(质量分数)三氯乙酸标准溶液，混匀，离心，取上清液，将溶液pH调至7.2,得到待测样品溶液。移取1.0 g·L~(-1)二胺氧化酶标准溶液100μL,加入100μL待测样品溶液，于50℃水浴中反应15 min。反应结束后，依次加入1.0 g·L~(-1)辣根过氧化物酶标准溶液50μL,0.5 g·L~(-1)四甲基联苯胺标准溶液200μL和2 mol·L~(-1)盐酸溶液50μL,采用紫外-可见分光光度计测定体系的吸光度。结果显示：样品溶液由无色变为蓝色又变为黄色；组胺、腐胺的浓度分别在2.5～150μmol·L~(-1)和5～200μmol·L~(-1)内与其对应的吸光度呈线性关系，检出限(3S/N)分别为0.652 2μmol·L~(-1)和1.134 1μmol·L~(-1)。对空白牛奶样品进行加标回收试验，组胺和腐胺的回收率分别为80.5%～88.3%和89.5%～92.3%,测定值的相对标准偏差(RSD,n=5)分别为2.5%～4.4%和4.4%～5.1%。

• 单位
  光明乳业股份有限公司; 上海理工大学