miR-451a和miR-21-5p双重qPCR检测体系的建立及应用

作者：胡舒啸; 陈惠香; 胡胜; 赵一霞; 季安全; 李洋; 廉洁^*; 孙启凡^*

来源：生物化学与生物物理进展, 2023, 1-12.

DOI：10.16476/j.pibb.2023.0211

• 法医遗传学
• 体液鉴别
• 双重qPCR
• 微RNA

目的 为了提高微量样本中miRNA的检测通量和检测效率，本文建立了一种能够同时准确定量两种miRNA的双重实时荧光定量PCR（quantitativereal-timePCR，qPCR）检测体系，并通过实际样本检测验证其应用于体液鉴别的效果。方法设计适用于miRNA双重检验的相关引物及探针并优化实验体系组分，建立基于TaqMan技术的miRNA双重qPCR检测体系并验证其特异性、灵敏度和可重复性；使用此检测体系对58份不同体液样本中的miR-451a与miR-21-5p进行检测，并借助miR-451a与miR-21-5p的比值鉴定法评估该体系的体液鉴别能力；使用该检测体系样本数据确定的最佳截断值对模拟案件样本进行鉴别。结果 优化的检测体系能够实现对血液与非血液、月经血与外周血的100%区分同时可以实现对模拟案件样本的准确鉴别。结论该双重qPCR检测体系将时间和材料成本均缩短至原来的一半，为后续建立更多重的qPCR检测体系并应用于体液鉴别打下了基础。

• 单位
  中国人民公安大学; 山西医科大学