科研之友
微信
新浪微博
Facebook
分享链接
摘要
目的探讨低蛋白饮食喂养、尼古丁皮下注射及自然选择3种方法形成的胎儿生长受限(FGR)大鼠模型胎盘细胞凋亡情况及所致大鼠FGR可能的致病机制。方法 2018年6月至2019年1月于南方医科大学南方医院动物实验中心将26只Wistar雌鼠随机分为非干预组(n=14)、低蛋白饮食组(n=6)和尼古丁注射组(n=6)。非干预组大鼠正常饲养,低蛋白饮食组及尼古丁注射组分别采用相应干预手段建立FGR模型。非干预组共获子鼠132只,有12只出生体重低于同组平均体重2个标准差的FGR弱仔,收集弱仔胎盘作为研究组1(自然选择组);低蛋白饮食组共获子鼠67只,其中FGR弱仔20只,随机选择18只弱仔胎盘作为研究组2(低蛋白饮食组)。尼古丁注射组共获子鼠60只,其中FGR弱仔21只,随机选择18只弱仔胎盘作为研究组3(尼古丁注射组)。在非干预组随机选择42只适龄幼仔胎盘作为正常对照组。采用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)染色检测各组胎盘细胞凋亡率,逆转录聚合酶链反应法(RT-PCR)检测细胞凋亡因子(Bax、Bcl-2、p53、Fas和Fas-L)mRNA表达水平,免疫组织化学染色检测蛋白表达水平。结果低蛋白饮食和尼古丁皮下注射均成功建立FGR大鼠模型,其FGR发生率明显高于非干预组(正常对照组)(29.89%,35%vs. 9.09%,P<0.05)。自然选择组和尼古丁注射组胎盘细胞凋亡率均显著高于正常对照组[(66.120±14.611)%,(73.046±13.666)%vs.(28.740±27.184)%,P<0.01];低蛋白饮食组胎盘细胞凋亡率稍高于正常对照组,差异无统计学意义。与正常对照组相比,研究组1中Bcl-2、Fas-L表达水平显著降低[mRNA表达水平:Bcl-2(0.257±0.043)vs.(1.000±0.260),P<0.01;Fas-L(0.285±0.065)vs.(1.000±0.196),P<0.01;蛋白表达水平:Bcl-2 34.60 vs. 54.63,P<0.01;Fas-L 31.93 vs.64.65,P<0.01];研究组2中Bcl-2、Fas-L表达水平显著降低[m RNA表达水平:Bcl-2(0.261±0.029)vs.(1.000±0.260),P<0.01;Fas-L(0.423±0.032)vs.(1.000±0.196),P<0.01;蛋白表达水平:Bcl-2 40.05 vs. 54.63,P<0.01;Fas-L 32.45 vs. 64.65,P<0.01];p53表达水平显著升高[m RNA表达水平:(1.433±0.151)vs.(1.000±0.242),P<0.01;蛋白表达水平:48.00 vs. 29.10,P<0.01];研究组3中Bax、p53、Fas表达水平显著升高[mRNA水平:Bax(1.438±0.177)vs.(1.000±0.113),P<0.01;p53(2.176±0.356)vs.(1.000±0.0.242),P<0.01;Fas(1.335±0.076)vs.(1.000±0.090),P<0.01;蛋白表达水平:Bax 52.10 vs. 36.45,P<0.05;p53 52.90 vs. 29.10,P<0.01;Fas 49.03 vs.30.35,P<0.05];Bcl-2、Fas-L表达水平显著降低[mRNA水平:Bcl-2(0.213±0.024)vs.(1.000±0.0.260,P<0.01);Fas-L(0.503±0.100)vs.(1.000±0.0.196),P<0.01;蛋白表达水平:Bcl-2 32.73 vs. 54.63,P<0.01;Fas-L 32.98 vs.64.65,P<0.01]。结论 3种因素所致大鼠FGR胎盘细胞凋亡率均显著升高,说明胎盘细胞凋亡与FGR形成存在关系。低蛋白饮食、尼古丁及自然因素所致FGR大鼠胎盘细胞凋亡途径、凋亡相关因子各不相同,说明不同因素诱发FGR的机制也不完全一致。
- 单位
