摘要
目的探讨微小RNA(miRNA,miR)-22是否参与调控人动脉平滑肌细胞(ASMCs)功能及其机制。方法实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)和荧光原位杂交观察miR-22在动脉壁中的表达特点;细胞计数试剂盒(CCK-8)法、迁移小室(Transwell)及流式细胞实验分别检测miR-22对ASMCs增殖、迁移及凋亡的影响;双荧光素酶基因报告实验确定miR-22的靶基因;通过慢病毒过表达miR-22后,观察其对大鼠颈动脉球囊损伤后新生内膜的影响。结果 (1)miR-22在动脉硬化闭塞症(ASO)血管壁中表达(0.256±0.046)明显低于正常血管壁(0.946±0.081,P=0.000),且其主要定位于动脉中层;(2)与对照组比较,miR-22具有抑制ASMCs增殖(1.146±0.050比1.677±0.082,P=0.000)和迁移(16.50±1.38比37.83±2.54,P=0.000),促进凋亡的功能[(7.33±0.98)%比(3.95±0.89)%,P=0.000]。(3)双荧光素酶基因报告实验证实真核生物延伸因子2激酶(eEF2K)是miR-22的靶基因,miR-22可在转录后水平负性调控eEF2K表达;(4)慢病毒(LV)-miR-22组(0.832±0.126)与对照组(1.579±0.215,P=0.000)比较,明显减少大鼠颈动脉新生内膜面积。结论 miR-22通过靶向结合eEF2K,抑制ASMCs增殖及迁移、促进凋亡,减少新生内膜增生。
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单位南方医科大学南方医院; 广东医科大学附属医院