氟暴露对HT22海马神经元细胞miR-204和BDNF-TrkB通路的影响

作者：罗雨; 李昌静; 谢春^*; 谭瑛

来源：中华地方病学杂志, 2020, (03).

• 氟
• HT22细胞
• 微小核糖核酸-204
• 脑源性神经营养因子
• 酪氨酸激酶B

目的 探讨氟暴露对小鼠海马神经元细胞(HT22细胞)微小核糖核酸(microRNA,miRNA,miR)-204、脑源性神经营养因子(BDNF)、酪氨酸激酶B(TrkB)表达的影响。方法 将HT22细胞暴露于0(对照)、2、4、6、8、10 mg/L氟化钠(NaF)。培养24 h后,CCK-8法检测细胞活性,根据细胞存活率结果,选取0.0(对照)、2.5、5.0、10.0 mg/L NaF,作用于未转染和转染(加入miR-204激动剂)的HT22细胞24 h,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和蛋白免疫印迹(Western blot)法分别检测细胞中miR-204表达,BDNF、TrkB mRNA和蛋白表达。结果 与对照组比较,各染氟组细胞存活率降低(P均< 0.01)。未转染细胞中,与对照组比较,miR-204表达升高(P < 0.05或< 0.01)；5.0、10.0 mg/L染氟组BDNF mRNA表达降低(P均< 0.01),各染毒组BDNF蛋白表达降低(P < 0.05或< 0.01)；各染毒组TrkB mRNA表达降低(P < 0.05或< 0.01),5.0、10.0 mg/L染氟组TrkB蛋白表达降低(P均< 0.01)。转染细胞中,与对照组比较,各染毒组miR-204表达升高(P均< 0.01),BDNF、TrkB mRNA和蛋白表达下降(P均< 0.01)。细胞存活率与染氟浓度呈负相关(r = - 0.989,P < 0.01)；染氟浓度与BDNF、TrkB mRNA、蛋白表达呈负相关(r = - 0.746、- 0.853、- 0.889、- 0.827,P均< 0.01)；miR-204表达与染氟浓度呈正相关(r = 0.889,P < 0.01),与BDNF、TrkB mRNA和蛋白表达呈负相关(r = - 0.766、- 0.770,- 0.594、- 0.523,P均< 0.01)；TrkB mRNA和蛋白表达与BDNF mRNA和蛋白表达呈正相关(r = 0.657、0.869,P均< 0.01)。结论 氟降低HT22细胞活性,作用机制可能与上调miR-204表达后抑制了BDNF-TrkB通路有关。

• 单位
  贵州医科大学; 公共卫生学院