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摘要
目的 探讨血管内皮细胞培养基对胃癌细胞增殖和迁移的影响，分析血管内皮细胞调控胃癌细胞发生转移的机制。方法 设置对照组和共培养组，分别将正常培养基和人脐静脉血管内皮细胞HUVEC条件培养基作用于胃癌细胞HGC27,采用MTT法和划痕试验检测胃癌细胞HGC27的增殖活性和迁移能力。设置Control组、6 h组、12 h组和24 h组，以HUVEC的条件培养基作用于胃癌细胞6、12和24 h, Western blot检测EMT标志物和紧密连接蛋白的表达变化，激光共聚焦显微镜观察细胞骨架和紧密连接蛋白的分布变化。结果 MTT及划痕试验表明HUVEC条件培养基促进胃癌细胞HGC27的增殖和迁移。与Control组比较，间接共培养后胃癌细胞的形态呈间充质状改变，丝状伪足样凸起数量显著增加。Western blot结果显示间接共培养后胃癌细胞上皮标志物E-cadherin表达水平逐渐下降，而间充质标志物N-cadherin和MMP-9逐渐增加，具有时序性变化规律。ZO-1和Occludin的表达也逐渐下降，细胞膜分布减少。结论 间接共培养下，血管内皮细胞通过上调胃癌细胞MMP-9,破坏紧密连接，促进胃癌细胞增殖和迁移。
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单位宜昌市第二人民医院; 第一临床医学院; 宜昌市中心人民医院; 三峡大学
