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摘要
目的:构建耐阿糖胞苷的急性髓系白血病(AML)细胞株，探讨Sirt1、PGC-1α表达水平与耐药的相关性。方法:使用人急性原粒细胞白血病细胞Kasumi-1,采用Ara-C药物浓度逐渐增加的方法诱导细胞，通过CCK-8法检测加药前后Kasumi-1细胞的IC50值，从而构建耐Ara-C细胞株；RT-qPCR检测Kasumi-1耐药株和亲本细胞株中Sirt1、PGC-1α mRNA的表达水平，蛋白免疫印迹Western blot检测Kasumi-1耐药细胞株和亲本细胞株中Sirt1、PGC-1α蛋白的表达水平。结果:构建后的Kasumi-1耐药细胞株具有常见的耐药细胞株的镜下形态特征，耐药指数大于5,表明Kasumi-1耐药株构建完成后具有良好的耐药性；RT-qPCR和Western blot检测发现在耐药细胞株中Sirt1和PGC-1αmRNA和蛋白的表达水平均高于亲本细胞株(P<0.001)。结论:采用浓度逐渐增加的方法可成功诱导出AML耐Ara-C细胞株，Sirt1与PGC-1α共同高表达可能介导了AML细胞耐药。
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