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摘要
目的本实验探讨靶向沉默CDCA5基因的表达对人乳腺癌细胞增殖的影响及其主要机制。方法采用Western blot检测乳腺癌组织、癌旁正常组织和人乳腺癌细胞系MCF-7、MDA-MB-231及MDAMB-435s细胞中CDCA5蛋白的表达。针对CDCA5基因的siRNA,设阴性对照组siRNA-NC及空白对照组Blank。PCR检测各组对CDCA5基因的沉默效果。MTT法检测siRNA、siRNA-NC和Blank各组细胞增殖能力,流式细胞仪分别检测3组细胞周期的变化。Western blot用于分析Plk1、SA2和pSA2蛋白表达情况。结果 CDCA5在乳腺癌组织中的表达明显高于癌旁正常组织。人乳腺癌细胞系MDA-MB-435s中CDCA5蛋白的表达明显高于MCF-7和MDA-MB-231细胞系。siRNA在各组中有最强的基因沉默效果,与siRNA-NC和Blank组相比,siRNA组细胞增殖能力明显降低(P<0.05),处于细胞周期G2/M期的细胞数量明显增多(P<0.05)。沉默CDCA5基因后Plk1和pSA2蛋白表达明显降低。结论沉默CDCA5基因可有效抑制乳腺癌细胞增殖,这可能与下调CDCA5/Plk1/SA2信号通路从而使细胞周期被阻滞在G2/M期有关。
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单位重庆医科大学附属第一医院; 四川省南充市中心医院
