敲除大麻素Ⅱ型受体影响APP/PS1小鼠前额叶皮质小胶质细胞功能与激活PI3K/Akt/mTOR通路有关

作者：袁蜜蜜; 刘坤璐; 陈美桦; 陈浩正; 史敬璞; 李锦; 孙家广^*; 王勃^*

来源：中国药理学与毒理学杂志, 2022, 36(09): 649-656.

• 大麻素Ⅱ型受体
• 阿尔茨海默病
• 小胶质细胞
• 神经源性炎症

目的 研究大麻素Ⅱ型受体（CB2R）基因敲除对阿尔茨海默病（AD）小鼠发病前期空间学习与记忆能力的影响，并从分子水平探讨可能的作用机制。方法 C57BL6/J小鼠根据基因型分为野生型对照组（WT）、CB2R敲除组（CB2-/-），模型组（APP/PS1）和模型+CB2R敲除组（APP/PS1*CB2-/-），采用Morris水迷宫实验检测4月龄小鼠的空间学习与记忆能力，ELISA检测小鼠脑内β淀粉样蛋白（Aβ）1-42和Aβ1-40含量，实时荧光定量PCR法检测前额叶皮质和海马脑区炎症因子白细胞介素6(IL-6)，肿瘤坏死因子α(TNF-α)和诱导型一氧化氮合酶（iNOS）mRNA表达水平，免疫荧光法检测小胶质细胞形态变化，Western印迹法检测小鼠脑内炎症相关信号通路中磷酯酰肌醇3激酶（PI3K）蛋白表达水平及蛋白激酶B(Akt)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）、细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)和p38丝裂原活化蛋白激酶（p38 MAPK）蛋白磷酸化水平。结果 与APP/PS1组相比，APP/PS1*CB2-/-组小鼠在Morris水迷宫实验中的潜伏期、目标象限停留时间和穿台次数无显著差异，提示CB2R敲除并不影响APP/PS1小鼠的空间学习与记忆能力；与APP/PS1组相比，APP/PS1*CB2-/-组小鼠前额叶皮质Aβ1-42含量和IL-6 mRNA表达水平均显著性升高（P<0.05）;APP/PS1组小鼠前额叶皮质小胶质细胞形态呈阿米巴状样，APP/PS1*CB2-/-组小鼠小胶质细胞形态发生明显改变，呈细长分支状；与APP/PS1组小鼠相比，APP/PS1*CB2-/-组小鼠前额叶皮质PI3K蛋白表达水平及Akt和mTOR蛋白磷酸化水平显著升高（P<0.05）,ERK1/2和p38 MAPK蛋白磷酸化水平无显著差异。结论 CB2R敲除影响APP/PS1小鼠前额叶皮质小胶质细胞的功能，可能与激活PI3K/Akt/mTOR通路有关。

• 单位
  河北医科大学第四医院; 药物研究所; 邢台市人民医院