山羊痘病毒疫苗株ORF31/ORF117/ORF72编码蛋白的原核表达及抗原性分析

作者：邵佳; 闫丰超; 窦永喜; 朱学亮; 王秋霞; 骆学农; 许立华

来源：中国兽医科学, 2013, (09): 930-935.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2013.09.006

• 山羊痘病毒
• DNA结合核衣壳蛋白(ORF31)
• 融合蛋白(ORF117)
• 蛋白磷酸酶(ORF72)
• 原核表达
• 抗原性分析 goatpox virus
• ORF31protein
• ORF117protein
• ORF72protein
• prokaryotic expression
• antigenic analysis

为了研究羊痘病毒蛋白的功能,将羊痘病毒的DNA结合核衣壳蛋白(ORF31)、融合蛋白(ORF117)、蛋白磷酸酶(ORF72)3个基因分别克隆至pET-30a(+)原核表达载体后,转化大肠杆菌细胞。重组表达菌经IPTG诱导后进行SDS-PAGE电泳,结果显示3个重组蛋白均在原核细胞中获得表达,且大部分以包涵体形式存在,ORF117和ORF72蛋白有少量可溶性蛋白。表达产物经镍柱纯化后进行Western-blot分析,ORF72蛋白能与山羊痘阳性血清反应,证明ORF72蛋白具有免疫反应原性,另外2种蛋白则无反应原性。

• 单位
  家畜疫病病原生物学国家重点实验室; 宁夏大学; 中国农业科学院兰州兽医研究所