摘要
目的探究异鼠李素对骨髓间充质干细胞成骨分化的影响。方法 3周龄C57BL/6J小鼠骨髓间充质干细胞在成骨诱导液下诱导成骨分化。细胞计数试剂盒(CCK-8)检测不同浓度的异鼠李素对成骨细胞毒性影响并行t检验以分析最低有效浓度。碱性磷酸酶(ALP)及茜素红染色观察有效浓度的异鼠李素对骨髓间充质干细胞成骨分化及矿化的影响。通过RT-PCR技术检测异鼠李素促成骨细胞分化的相关基因,包括骨桥蛋白(OPN)、骨钙蛋白(OCN)和ALP,并行t检验分析。蛋白印迹及免疫荧光技术验证异鼠李素促成骨分化相关通路及蛋白表达。结果 5μmol/L(t=5.4,P <0.01)和10μmol/L(t=7.2,P <0.01)异鼠李素对骨髓间充质干细胞增殖有促进作用,并且呈现浓度依赖性,而20μmol/L(t=4.2,P <0.01)异鼠李素明显抑制了细胞增殖,有毒副作用。通过碱性磷酸酶及茜素红染色染色发现10μmol/L异鼠李素碱性治疗的碱性磷酸酶染色及形成的钙结节较多。通过蛋白印迹技术发现,异鼠李素激活了p38信号通路。结论 10μmol/L异鼠李素通过激活p38信号通路达到促进骨髓间充质干细胞成骨分化。
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单位上海市金山区亭林医院