粪肠球菌介导结核分枝杆菌重组Efs(pGEX-ESAT-6)疫苗的构建、鉴定及表达

作者：李文桂^*; 欧兴坤; 何爱琳

来源：中国病原生物学杂志, 2023, 18(10): 1137-1140.

DOI：10.13350/j.cjpb.231005

• 粪肠球菌
• 结核分枝杆菌
• ESAT-6
• 疫苗

目的 构建粪肠球菌(Efs)介导的结核分枝杆菌重组Efs(pGEX-ESAT-6)疫苗，对表达的融合蛋白进行检测分析。方法 采用电穿孔方法将重组质粒pGEX-ESAT-6转化粪肠球菌ATCC47077株，构建rEfs(pGEX-ESAT-6)疫苗，抽提质粒进行PCR鉴定；经IPTG诱导表达后用SDS-PAGE和Western blot对表达产物进行分析和鉴定。结果 以从rEfs抽提的质粒为模板进行PCR,扩增出约288 bp的ESAT-6基因片段，SDS-PAGE显示表达产物为32 ku的融合蛋白，约占菌体总蛋白的20%;Western blot显示该融合蛋白能被结核病患者血清识别。结论 成功构建了结核分枝杆菌rEfs(pGEX-ESAT-6)疫苗，表达的融合蛋白具有反应原性。

• 单位
  重庆医科大学附属第一医院