W544F定点突变提高苏云金杆菌Cry1Ac蛋白的稳定性

作者：王发祥; 夏立秋; 丁学知; 赵新民; 单世平; 莫湘涛; 张友明; 喻子牛

来源：高等学校化学学报, 2008, (10): 1999-2002.

• Cry1Ac蛋白
• 定点突变
• 色氨酸
• 苯丙氨酸
• 稳定性 Cry1Ac protein
• Site-directed mutagenesis
• Tryptophan
• Phenylalanine
• Stability

W544是Cry1Ac蛋白上独特于其它Cry类蛋白的一个氨基酸,它与F578和F604一起组成一个"螺旋桨状"的疏水簇,通过疏水相互作用维持蛋白的三维结构稳定.本研究通过定点突变将W544保守地替换为苯丙氨酸,SDS-PAGE分析结果表明其纯化的原毒素对紫外照射、胰蛋白酶处理和室温存贮的稳定性相对于野生Cry1Ac都有一定程度的提高;经原子力显微镜观察,发现W544F产生的晶体两个顶点间的垂直距离比野生型Cry1Ac约长0.6μm,且晶体表面不及野生型光滑;此外,W544F与野生Cry1Ac的杀虫活性相似,但经过紫外光照射9 h后,其保留的杀虫活性比野生型高4倍以上.W544F突变较好地解决了...

• 单位
  湖南师范大学; 生命科学学院; 农业微生物学国家重点实验室